Existem inifinitos trens de Roma a Florença, acho dificil ficar sem trem! O que voce pode fazer é comprar seu bilhete dia 28, quando chegar em Roma. Assim voce já garante e não deixa pra ultima hora. 

Florença é uma cidade incrível e tem muita coisa para fazer! Os museus são maravilhosos, porém como você não terá tempo não aconselho que entre em algum! Eu iria visitar a St Maria of Florence Cathedral 
 e a Piazza della Signoria !